逆转录病毒是一类具有RNA基因组的包膜病毒。在进入宿主细胞后,它们依靠逆转录酶,将基因组从RNA逆转录为DNA,然后整合到处于分裂期的宿主基因组中,并且作为宿主细胞DNA的一部分进行复制。因此,逆转录病毒可作为外源基因转移的有效载体,已被广泛开发并用于研究基因功能和治疗、发育过程、肿瘤发生等。迄今为止,鸟类逆转录病毒载体(RCAS)及其受体(TVA)系统在哺乳动物转基因模型中得到广泛应用。RCAS-TVA模型可与现有的转基因、敲除或敲入模型的结合,为研究人类癌症小鼠模型中的基因功能提供了一种简单快速的方法。
RCAS病毒保留了复制所需的所有病毒基因,当RCAS载体进入细胞后可直接编码感染性颗粒并组装成所需的蛋白质,因此不需要辅助细胞。首先通过删除src致癌基因并插入多克隆位点,构建可稳定表达外源目的基因的RCAS载体,随后将RCAS载体转染DF1细胞,经过培养、纯化等系列操作可获得高滴度的RCAS病毒。该生产系统灵活性高、通用性强、病毒质量高、产量高,适于大规模放大生产。
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