A::1. 染色法:以染色部位、颜色不同来标记区分实验动物;2. 耳孔法:根据打在动物耳朵上的部位和孔的多少,来区分实验动物的方法,可标记三位数之内的号码;3. 烙印法:造成轻微损伤;4.挂牌法:将编好的号码烙印在金属牌上,挂在实验动物颈部、耳部、肢体或笼具上;5. 笼子编号法;6. 断趾编号法 、剪尾编号法、被毛剪号法等。
雄性 | |
体重(g) | 日龄(天) |
<12 | <23 |
13-15 | 24-28 |
16-18 | 29-35 |
19-21 | 36-45 |
22-24 | 45-63 |
雌性 | |
体重 | 日龄(天) |
<12 | <23 |
13-15 | 24-31 |
16-18 | 32-52 |
19-21 | 53-77 |
22-24 | 78-105 |
(1)腹腔麻醉 把异氟烷和脂肪乳混合做成乳化异氟烷,腹腔注射,3分钟麻醉,30分钟清醒。
(2)吸入麻醉 将大鼠封入密封缸中,注入液态吸入麻醉药。
(3)经口气管插管 腹腔麻醉,四肢仰面固定,上下切牙用丝线系住作牵引,操作者头戴额镜,对面放置好光源,牵出舌头和下切牙丝线一起由左手捏住,上切牙丝线由助手提着或用止血钳夹住用自己的前胸固定,拉动丝线使头部上提和口充分张开,右手持18G或16G套管针,看到声门既可插管。
(1)小鼠需要固定好,头和躯体要保持一条直线,并且灌胃时使小鼠成竖直位,头向上;
(2)灌胃剂量可选0.1 mL/10 g或0.2 mL/10 g,根据实际情况决定,防止小鼠灌胃后俯卧喘息;
(3)操作前将灌胃针安在注射器上大致测量一下从口腔到胃内的位置(最后一根肋骨后缘)的长度,根据此距离确定插入深度,成年小鼠插入大约3厘米;
(4)从小鼠的嘴角进针,进去后让灌胃针顺着小鼠的上腭压住它的舌头进入食道,当中有突破感,突破感过后和灌液体时无明显阻力;
(5)成年小鼠每次最大可灌1.0 mL。
(1)皮内接种:通常以背部皮肤为宜。
(2)皮下接种:选用腹壁、背部或腹股沟等处。
(3)肌肉接种:一般选用臀部和大腿部肌肉,若为禽类以胸部肌肉为宜。
(4)静脉接种:家兔以耳静脉外缘为宜,小鼠和大鼠科注射尾静脉,豚鼠科注射后腿静脉,鸡可注射翅下静脉。
(5)腹腔接种:常用于小白鼠。
(6)脑内接种:常用于小白鼠。家兔、豚鼠由于颅骨较硬,需用钢锥先打孔后注射。
(7)脚掌(垫)接种。
小鼠日龄/d | 初生 | 5 | 10 | 15 | 20 | 25 | 30 |
小鼠体重/g | 1.8 | 4.0 | 6.0 | 11.0 | 15.0 | 21.0 | 21.0 |
大鼠日龄/d | 初生 | 10 | 20 | 30 | 40 | 50 | 60 |
大鼠体重/g | 6-7 | 17-25 | 35-50 | 55-90 | 100-150 | 150-210 | 170-240 |
(1)注射前可用50 ℃左右热水浸泡小鼠尾部约1 min左右,见尾静脉明显充盈起来即可;
(2)拉平拉紧尾部,使得尾部静脉处于一个平面上;若无法完成,可用手托起或踮起部分尾部使尾静脉伸展;
(3)注射前用酒精涂抹尾部,使尾静脉完全暴露;
(4)注射时要斜面向上,选择平行与尾静脉的方向刺入,不要有任何角度,刺入约0.5-1cm后退针但不要完全退出,斜面退出约一半时如果针在血管里会有血冒出,然后再次进针,进针距离要短于第一次进针距离,否则会刺穿血管!然后推注液体,此时应该不会感到有很大阻力,可以看到尾静脉血管变白,但是周围组织没有肿,此时顺利完成尾静脉注射;
(5)不推荐根据推注压力感觉是否进入血管,因为这样会浪费一部分细胞,会导致计数不准。